M13 bacteriophage scaffold
M13 bacteriophage scaffold (M13 박테리오파지 스캐폴드)
Nam 연구실의 SERS-바이오센싱 연구 전반에서 유전적으로 프로그래밍 가능한 구조 템플릿으로 사용되는 필라멘트형 M13 bacteriophage. 바이러스 본체는 길이 ~880 nm × 직경 6.6 nm이며 (see Lee et al., Small (2014), text); **pVIII 주요 외피 단백질(major coat protein, ~2700 copies)**이 전체 길이를 덮고 있어 display용으로 조작 가능하고, **pIII 부 외피 단백질(minor coat protein, ~5 copies)**은 한쪽 끝에 위치한다. 이 기하 구조 덕분에 스캐폴드는 신호 생성과 분자 인식을 공간적으로 분리할 수 있다: pVIII는 플라즈몬/SERS-활성 입자를 본체를 따라 배열하고, pIII는 한쪽 끝에 인식 모이어티를 운반한다 (see Lee et al., Bull. Korean Chem. Soc. (inferred) (2012), Introduction).
이는 scaffold 서브타입의 표준 예시이다: 제품에 통합되어 다른 구성요소의 공간적 조립을 조직화하되, 소비되거나 촉매적이거나 카이랄성을 부여하지 않는 (생)분자 템플릿(cf. wiki/CLAUDE.md §3).
Display된 펩타이드 변종
- (a) Lee2014 — pVIII는 gold-nanocube-50nm-SERS의 CTAB 이중층에 결합하는 Pro-Asp (PD) 다이펩타이드를 display하고; pIII는 배향성 있고 화학 처리가 필요 없는 항체 포획을 위해 anti-PSA-scFv를 display한다 (see Lee et al., Small (2014), Fig. 1). 조립된 대상은 virus-templated-AuNC-chain-V-probe이다.
- (b) Lee2017 — pVIII는 AEPDDP (Ala-Glu-Pro-Asp-Asp-Pro)를 display하며, 이는 무작위화된 (NNK)₂ helper-phage 라이브러리를 50 nm 금 나노큐브에 대해 biopanning하여 선별되었다; (X)₂ 라이브러리는 3라운드 후 93.33% Pro-Asp로 농축되었고, 효율적인 phage 증폭/조립을 위해서는 노출된 펩타이드 길이가 ≤6 잔기여야 한다 (see Lee et al., ACS Synthetic Biology (2017), Fig. 2, Table 1). phage-gold-nanocube-complex를 산출한다.
- (c) Lee2012 — 가장 초기의 Nam 연구실 M13 SERS 면역분석 스캐폴드: pVIII가 금 나노입자(+ Raman 리포터)를 배열하고, pIII가 항체를 운반한다 (see Lee et al., Bull. Korean Chem. Soc. (inferred) (2012), Abstract). M13-SERS-immunoassay-probe 참조.
왜 하나의 스캐폴드, 두 가지 역할인가
기존 SERS 프로브는 단계적 화학 결합으로 제작되므로 리포터 개수와 항체 배향이 프로브마다 달라진다. 조립 모티프(pVIII)와 인식 모이어티(pIII)를 모두 유전적으로 인코딩하면 균일하고 재현성 있는 프로브가 얻어지고, 타겟팅 모이어티를 플라스미드 편집만으로 교체할 수 있다 — genetic-dual-display-functionalization 참조.