Sortase + SPAAC 기반 나노바디-나노입자 방향성 생체접합

나노바디를 금 나노입자의 C-말단에 접합하기 위한 부위 특이적, 방향성 전략 (see Lee et al., ACS Appl. Mater. Interfaces (2023), PDF p. 4 Experimental).

2단계 화학 반응

1. Sortase A 트랜스펩티데이션. Sortase A는 나노바디 C-말단의 LPXTG 모티프를 인식하고, DBCO가 부착된 GGG-펩타이드를 해당 위치에 트랜스펩티데이션한다 (거의 정량적 수율, 부반응 없음).
2. SPAAC (변형-촉진 아자이드–알카인 고리화 첨가반응). DBCO기가 나노입자 표면에 도입된 아자이드기와 반응한다 (EDC/NHS 커플링 + 아자이도프로필아민).

중요성

• C-말단 배치를 통한 방향 제어: 나노바디의 항원 결합 부위(N-말단 위치)가 나노입자 표면으로부터 멀어지는 방향으로 배향되어 결합 활성이 보존된다.
• 말레이미드 화학 대비 장점: 다이설파이드 환원이 불필요하며, 분해성 산물이 생성되지 않는다 (see Lee et al., ACS Appl. Mater. Interfaces (2023)).

관계

432-helicoid-III/octahedral-gold-50nm-CTAC 기판 및 VHH₇-nanobody/VHH-X118-nanobody 표적화 모이어티로부터 nanobody-modified-gold-NP-probe (조립된 소자)를 생성한다. 탑재량은 nanobody-surface-loading-density에서 정량화된다.